Abstrak

Pengesahan proses penapisan pensterilan adalah langkah kritikal dalam memastikan produk farmaseutikal memenuhi keperluan kemandulan semasa pembuatan. Proses pengesahan ini penting untuk menjamin kualiti produk dan keselamatan pesakit. Artikel ini mengkaji objektif, kaedah ujian dan kriteria penerimaan kajian pengesahan utama, termasukujian keserasian kimia, ujian pengekalan bakteria, danujian boleh diekstrak dan boleh larut lesap (E&L)..

Pensterilan penapisan ialah proses pengasingan fizikal yang menyingkirkan mikroorganisma daripada cecair atau gas melalui pengekalan membran. Di bawah keadaan proses yang ditentukan, penapis mesti mampu mengekalkan10⁷ CFU/cm²daripadaBrevundimonas diminutasetiap sentimeter persegi kawasan penapisan yang berkesan untuk memastikan kemandulan produk.

TheGaris Panduan GMP 2023 untuk Persediaan Steril (Jilid I)danLaporan Teknikal PDA No. 26 (TR26): Pensterilan Penapisan Cecairmenyediakan panduan komprehensif untuk pensterilan pengesahan penapisan. Aktiviti pengesahan termasuk pemilihan penapis, ujian pengekalan bakteria, ujian integriti, dan penilaian keserasian antara penapis dan cecair proses. Panduan ini juga menekankan kaedah pensterilan penapis, ujian integriti selepas-penggunaan dan pertimbangan mengenai penggunaan semula penapis.

Dengan mengikuti cadangan GMP dan PDA TR26, pengeluar farmaseutikal boleh melaksanakan dan mengesahkan proses penapisan pensterilan dengan berkesan. Walau bagaimanapun, pensterilan pengesahan penapisan kekal sebagai aktiviti kompleks yang melibatkan pelbagai pertimbangan teknikal dan telah menjadi tumpuan yang semakin penting semasa pemeriksaan GMP. Kertas kerja ini membincangkan kajian pengesahan utama, strategi pengesahan yang sesuai, dan titik kawalan kritikal sepanjang proses pengesahan.

 

1. Ujian Keserasian Bahan Kimia

Ujian keserasian kimia menilai sama ada kartrij penapis pensterilan akan mengalami tindak balas kimia yang tidak diingini atau interaksi dengan cecair proses di bawah keadaan operasi yang ditetapkan.

1.1 Kaedah Ujian untuk Keserasian Bahan Kimia

Keserasian kimia biasanya dinilai menggunakan salah satu daripada dua pendekatan:

Ujian rendaman statik

Ujian penapisan peredaran semula dinamik

Dalamujian rendaman statik, penapis atau membran direndam dalam cecair proses dalam keadaan operasi-terburuk. Ciri fizikal penapis atau membran diukur sebelum dan selepas pendedahan.

Dalamujian peredaran semula dinamik, penapis disambungkan kepada bekas dan sistem paip yang mengandungi cecair proses. Pam peristaltik secara berterusan mengedarkan bendalir melalui gelung penapisan untuk mensimulasikan keadaan pembuatan sebenar. Selepas ujian, sifat fizikal penapis dibandingkan sebelum dan selepas penapisan.

1.2 Parameter Ujian

Kajian keserasian kimia harus menilaikeseluruhan pemasangan penapis.

Kesan keadaan proses pada penapis boleh dinilai dengan memantau perubahan dalam:

Integriti penapis keseluruhan (termasuk membran, perumah, cincin O-dsb.)

Bahan yang boleh diekstrak

Kekuatan tegangan

Kadar aliran

Tekanan pembezaan

Kualiti penapisan

Penapis penampilan

Pemerhatian Mikroskop Elektron Mengimbas (SEM).

Tekanan pecah

Penilaian rutin biasanya termasuk ujian integriti sebelum dan selepas merendam atau penapisan, bersama-sama dengan pengukuran dimensi fizikal penapis, termasuk:

Panjang

Diameter

Berat badan

Di samping itu, ciri-ciri membran yang memerlukan penilaian termasuk:

Penampilan permukaan

Ketebalan

Struktur membran

Saiz pori

Kekuatan tegangan

Antara parameter ini, struktur membran dan saiz liang biasanya dicirikan menggunakan mikroskop elektron pengimbasan (SEM).

1.3 Kriteria Penerimaan

Sepanjang kajian, penapis dan membran mesti berjaya melepasi semua ujian integriti.

Pemeriksaan visual hendaklah mengesahkan:

Tiada ubah bentuk

Tiada penumpahan zarah

Tiada perubahan warna

Untuk parameter fizikal lain seperti diameter, berat dan ketebalan, sisihan relatif bagi±2% hingga ±5%umumnya dianggap boleh diterima.

 

2. Ujian Pengekalan Bakteria

Walaupun pensterilan-penapis membran gred yang digunakan dalam pembuatan farmaseutikal biasanya mempunyai saiz liang nominal0.22 μm, saiz liang sahaja tidak cukup mewakili keupayaan pengekalan mikroorganisma penapis.

2.1 Kaedah Ujian

Ujian pengekalan bakteria biasanya dilakukan mengikutASTM F838-20, kaedah ujian standard yang diterbitkan olehASTM Antarabangsauntuk menilai prestasi pengekalan bakteria pensterilan-penapis membran gred.

2.2 Ujian Kawalan Positif

Untuk mengelakkan keputusan-negatif palsu yang disebabkan oleh mikroorganisma dengan saiz sel yang agak besar, organisma cabaran mesti ditunjukkan untuk melaluimembran 0.45 μm, yang berfungsi sebagai kriteria kawalan positif.

Brevundimonas diminutadikultur dalam medium pertumbuhan standard digunakan sebagai organisma cabaran. Di bawah keadaan cabaran yang tinggi (biasanyaLebih besar daripada atau sama dengan 10⁷ CFU/cm²kawasan penapisan berkesan), sebilangan kecil bakteria mampu menembusi a0.45 μmselaput.

Suspensi bakteria ditapis melalui amembran 0.45 μmdikendalikan selari dengan penapis ujian. Turasan hiliran kemudiannya ditapis melalui yang lain0.45 μmataumembran 0.22 μm. Jika bakteria cabaran cukup kecil, mereka akan melalui membran pertama dan dikekalkan oleh membran hiliran.

2.3 Ujian Daya Hidup Bakteria

Tujuan ujian daya maju bakteria adalah untuk menilai keupayaan hidup organisma cabaran dalam cecair proses dan menentukan sama ada cecair proses mempamerkan aktiviti bakteriostatik.

steril0.9% garam fisiologibiasanya digunakan sebagai penyelesaian kawalan. Kepekatan yang ditentukan bagiBrevundimonas diminuta (e.g., >10⁸ CFU/mL) disuntik ke dalam kedua-dua cecair proses dan larutan kawalan. Perubahan dalam populasi mikrob dipantau sepanjang tempoh proses yang ditetapkan.

Jika bilangan mikroorganisma yang berdaya maju dalam cecair proses berkurangan sebanyaktidak lebih daripada 1 logberbanding dengan penyelesaian kawalan, cecair proses dipertimbangkanbukan-bakteriostatikterhadap organisma cabaran. Sebaliknya, pengurangan melebihi1 balakmenunjukkan bahawa cecair proses mempunyai sifat bakteriostatik.

2.4 Pensterilan Radas Pengujian

Sebelum ujian cabaran bakteria, keseluruhan alat ujian hendaklah disterilkan olehpensterilan haba lembapuntuk memastikan kemandulan. Pensterilan wap biasanya dilakukan pada121 darjah selama 30 minit.

2.5 Pemilihan Penapis

Kerana pengekalan mikrob dikaitkan dengan keputusanujian titik gelembung tidak-yang merosakkan, titik gelembung yang lebih tinggi biasanya sepadan dengan titik gelembung yang lebih tinggiNilai Pengurangan Log (LRV). Oleh itu, kajian pengekalan bakteria sebaiknya dilakukan menggunakan kartrij penapis daripada kumpulan pengeluaran yang mempamerkan secara relatifnilai titik buih yang lebih rendah, mewakili keadaan-terburuk.

Kajian pengesahan untuk keupayaan pengekalan bakteria secara amnya melibatkantiga kelompok pengeluaran yang berbezadaripada penapis membran. Sekurang-kurangnya satu kumpulan sepatutnya telah lulus ujian integriti fizikal sambil menghasilkan keputusan yang berada di dalam10% daripada spesifikasi minimum pengilang yang boleh diterima, dengan itu mewakili keadaan marginal.

Begitu juga, keranakeputusan ujian aliran meresapjuga dikaitkan dengan prestasi pengekalan mikrob, apabila ujian aliran resapan dipilih sebagai kaedah ujian integriti, kartrij penapis dengannilai aliran resapan sempadanhendaklah dimasukkan dalam kajian pengekalan bakteria. Antara tiga penapis yang dinilai, sekurang-kurangnya satu harus mempamerkan hasil aliran resapan marginal.

2.6 Kriteria Penerimaan untuk Ujian Pengekalan Bakteria

Kriteria penerimaan untuk ujian pengekalan bakteria hendaklah merangkumi sekurang-kurangnya empat keperluan berikut:

1.Tiada koloniBrevundimonas diminutahendaklah dikesan pada membran analitik hiliran penapis ujian.

2.Koloni daripadaBrevundimonas diminutahendaklah diperhatikan pada membran analitik yang digunakan dalam ujian kawalan positif.

3. Keseluruhan alat ujian hendaklah kekal steril sepanjang kajian.

4. Suspensi cabaran bakteria hendaklah memenuhi tahap cabaran yang diperlukan, mengandungi sekurang-kurangnya1 × 10⁷ CFU daripadaBrevundimonas diminutasetiap sentimeter persegi kawasan penapisan berkesan.

Di samping itu, penapis mesti berjaya melepasi kedua-duanyapra-cabarandanmenyiarkan-ujian integriti yang mencabar, dan semua nilai integriti yang diukur hendaklah kekal dalam had penerimaan yang ditetapkan pengeluar.

 

3. Ujian Bahan Ekstrak dan Bahan Lesap (E&L).

Untuk memastikan bahawa sentuhan langsung antara cecair proses dan penapis tidak mengakibatkan pelepasan bahan daripada penapis ke dalam cecair proses, atau mendorong tindak balas kimia antara permukaan sentuhan yang menghasilkan sebatian baru,kajian boleh diekstrak dan boleh larut lesap (E&L).hendaklah dilakukan sebagai sebahagian daripada pengesahan proses penapisan pensterilan.

3.1 Kaedah Ujian untuk Boleh Diekstrak dan Boleh Dilarutkan

Ujian boleh ekstrak dan larut larut ialah penilaian keselamatan penting yang digunakan untuk menilai sebatian kimia yang mungkin berhijrah daripada pensterilan kartrij penapis ke dalam produk farmaseutikal.

Pelarut model yang hampir menyerupai formulasi ubat akhir secara amnya harus dipilih. Pelarut ini harus mempunyai ciri fizikal dan kimia yang sama atau serupa dengan produk siap.

Ujian yang boleh diekstrak biasanya dijalankan menggunakan sama ada:

Pengekstrakan statik (rendam)

Pengekstrakan peredaran semula dinamik

di bawah keadaan -terburuk yang ditentukan.

3.2 Kaedah Analitikal untuk Boleh Diekstrak dan Boleh Dilarutkan

Bahan yang boleh diekstrak dan bahan larut lesap yang dikeluarkan daripada kartrij penapis ke dalam medium pengekstrakan mungkin termasuk pelbagai kelas sebatian, termasuk:

Sebatian organik meruap (VOC)

Sebatian organik-separa meruap (SVOC)

Sebatian organik labil secara haba

Antioksidan

Bahan tidak-meruap

Sebatian organik meruap dan separa{0}}meruap, bersama dengan sebatian labil terma dan antioksidan, biasanya dianalisis menggunakanKromatografi Gas–Spektrometri Jisim (GC–MS)danTerbalik-Kromatografi Cecair Berprestasi-Fasa Tinggi (RP-HPLC).

Bahan tidak-mudah meruap biasanya dicirikan menggunakanResonans Magnet Nuklear (NMR)spektroskopi danSpektroskopi Inframerah Transformasi Fourier (FTIR).

3.3 Penilaian Toksikologi Bahan Boleh Diekstrak dan Bahan Lesap

Berdasarkan faktor seperti kepekatan bahan yang boleh diekstrak atau bahan larut resap dalam produk farmaseutikal siap, dos yang ditadbir, tempoh rawatan, dan laluan pemberian, penilaian keselamatan yang komprehensif hendaklah dijalankan mengikutICH Q3CatauICH M7garis panduan untuk memastikan bahawa bahan yang diekstrak daripada bahan penapis atau dilepaskan semasa pembuatan tidak menimbulkan potensi risiko kepada kesihatan manusia.

Semasa penilaian ini, komposisi kimia setiap yang boleh diekstrak atau boleh larut hendaklah dicirikan secara menyeluruh untuk memudahkan penilaian lanjut sama ada sebarang sebatian mengandungi amaran struktur atau ciri kimia lain yang membimbangkan toksikologi.

 

4. Kesimpulan

Pengesahan proses penapisan pensterilan merangkumi lebih daripadaujian keserasian kimia, ujian pengekalan bakteria, danujian boleh diekstrak dan boleh larut larut. Kajian tambahan, termasukpenilaian prestasi penjerapandanujian integriti menggunakan produk sebenar sebagai cecair pembasahan, hendaklah juga dijalankan di mana sesuai.

Aktiviti pengesahan ini hendaklah direka bentuk mengikut ciri cecair proses dan keadaan pembuatan khusus untuk memastikan pengesahan menyeluruh keberkesanan proses penapisan pensterilan.

Tambahan pula, setiap kali perubahan berlaku dalamproduk, penapis, atauparameter proses, kesahihan proses penapisan pensterilan yang layak sebelum ini harus dinilai semula. Oleh itu, selepas selesai pengesahan proses awal, penilaian berkala ciri produk dan keadaan proses harus dilakukan untuk menentukan sama adapengesahan semulaadalah perlu untuk memastikan keberkesanan dan keselamatan berterusan proses penapisan.

 

Rujukan

Liang, X.Perbincangan tentang Pengesahan Proses Penapisan Pensterilan dalam Pembuatan Farmaseutikal Steril.
Industri Kimia Guangdong, 2025, 52(15): 54–55.